如何用好新冠抗原快筛？怎么避免出现假阳（阴）性？

新冠核酸检测被各种指南推荐为确诊感染的金标准，但是核酸检测需要在生物安全高级别的实验室由专业检验师操作，完成核酸扩增获得报告需要花费数小时。在奥密克戎大流行的今天，随着更多密接人员及无症状、轻症患者居家隔离，完全依赖核酸检测排查病例或决定何时解除隔离，显然难以实现。

新冠抗原胶体金免疫层析法是一种快速抗原检测（RAT）的方法，不依赖于实验室，可由普通人自行操作， 15分钟内获取结果，新冠病毒RAT在境外其他新冠流行区已获得广泛应用。对于无症状或轻症患者，它能起到及早发现、及早自我隔离的重要作用。然而，作为一个粗筛手段，抗原快筛也可能出现假阳性、假阴性结果，这不足为奇。

一、抗原快筛的原理

目前常用的试剂，都以新冠病毒核衣壳蛋白（简称N蛋白）作为目标抗原。假设有一份含N蛋白的样本被滴入卡片，会发生什么呢？N蛋白需要在卡片上，过三关：

第一关：加样孔。内含胶体金新冠抗体，可以将它比喻为“警察”，“犯人”N蛋白在这儿被“警察”逮捕形成复合物；

第二关：阳性杠。内含T抗体，可以看作“法院”。“犯人-警察”的复合物再送到“法院”审理，三者结合成更大的复合物，结果会在此处出现一道杠，表示新冠抗原阳性；

第三关：有效杠。内含C抗体，相当于“笔录”。一部分“警察”完成逮捕后继续前进，在“笔录”处留下一道痕迹，表示此次逮捕有据可查、合法合规。如果没有有效杠，可能说明样本不够，或者胶体金抗体失效，那么检测也是无效的。

敲重点，“一道杠”“两道杠”代表内容看下图。

△ 抗原快筛卡片上每道杠出现的含义（图片由医院提供）

二、为什么会出现假阳（阴）性？如何避免？

首先科普一组基本概念：假阳（阴）性。只要是检测设备，有定量检测过程，无论是医学还是其它行业，都有假阳（阴）性的可能。

举个例，便利店的自动门装有红外探测器，人一靠近，门就打开。如果自动门坏了，太敏感，风一刮门就开。事实上没有阳，却误报阳性结果，就称为“假阳性”。反过来，人都到了门口，门却没反应，也就是，没把该阳性的结果报出来，即“假阴性”。

环境因素（风太大）、操作因素（有人踹门）、实验方法（红外线灵敏度太高）、受检测者自身因素（进门人太瘦），都可能造成假阳（阴）性结果。

充分理解假阳（阴）性的原因，可以尽量避免一些失误。

假阳性：

1、疏水性物质

如果样本中含有大量疏水性物质（也就是不溶于水），例如脂肪、细菌、细胞碎片等，会与加样孔里的胶体金抗体产生疏水亲和力（就像水面上浮起两滴油，它们会逐渐靠近并融合），同样可以产生类似N蛋白的复合物，导致假阳性。

2、酸性物质

胶体金抗体自带负电荷，可以吸引带正电荷的N蛋白。但如果样本的pH太低（即酸性，例如人呕吐、反酸之后），使得样本中的其它蛋白质偏离等电点而呈现正电荷（例如富含赖氨酸和精氨酸的蛋白在pH<10时就会带正电荷），同样可以吸附胶体金抗体而沉淀，产生假阳性。当然了，喝果汁是不会让鼻子变酸的。

3、过多细胞或太粘稠

样本含有过多的脱落细胞（如过度刮蹭鼻黏膜），或者液体太过粘稠，可能会堵塞或者减慢样本液在卡片上的流动，导致单有阳性杠，没有有效杠出现。所以测抗原前，要擤干净鼻涕。

4、放置太久

卡片长时间外露在空气中，可能会让各种抗体变质。

假阴性：

1、胶体金抗体失效

潮湿环境下，胶体金抗体会无法水解，因此无法暴露出位点和N蛋白结合。卡片太湿润也会导致条带显示不清晰。所以应注意在干燥环境中储存和操作卡片，千万不要把卡片放冰箱里哦。

2、样本问题

如果样本中N蛋白太多，大大超过胶体金抗体能结合的量，会影响免疫复合物的形成。在检验医学的ELISA反应中，这被称为后带（postzone）现象。此时需要进一步稀释样本才能得到阳性结果。

3、敏感性有限

当样本N蛋白浓度低于检测最低限度时，即使感染了也会测不出，此时很可能核酸还是阳性。因此抗原检测阳性的时间窗口比核酸要短（图2）。很多留学生在网上说自己确诊新冠“三天就转阴了”，其实很可能只是抗原转阴……

△新冠感染后抗原和核酸阳性的时间段有差别（图片由医院提供）

三、怎样用好抗原快筛？

讲完那么多，是不是抗原快筛的结果不值得信赖？不该去做这个检测？非也。

根据一篇纳入全球152个研究，共计超10万人次样本的荟萃分析结果，提示新冠抗原快筛的准确率，在有症状感染者中敏感性达73%（也就是有27%可能假阴性）；无症状感染者敏感性较差，为55%（45%可能假阴性）；特异性上面，有症状和无症状感染者，都达到了99%（也就是假阳性率不超过1%）。因此，对于快筛阳性的人来说，感染概率超过90%，无论有无不适，都该高度警惕，及时报备和自我隔离，做好就诊的准备。

结合当前我国新冠疫情防控工作形势，综合国外的使用经验，强烈建议在以下场景中运用抗原快筛作为工具：

（1）所在区、县有高风险区，一周内出现新冠“十大症状”之一；

（2）所在区、县有高风险区，1周内与确诊患者有密切接触（如在其中一方未戴口罩的情况下在密封环境共处，或距离<1米），特别是正在居家观察者；

（3）长期居家老人、残障人士、婴幼儿等不方便外出检测核酸的群体。

（4）决定是否解除隔离的居家阳性感染者。

对于不在高风险所在区、县居住，不是密接，也没有症状的朋友，以及已经感染正在恢复的朋友，目前都不建议盲目购买试剂卡自测。

理智运用，客观看待，才能用好抗原快筛，保护好自己和家人。

参考文献

1.Wenxia Shao。 Accurate Interpretation of SARS-CoV-2 Antigen Detection by Immunochromatography。 Front Med （Lausanne）。 2022 Jun 29；9：949554。 doi： 10.3389/fmed.2022.949554.eCollection 2022。 PMID 35847813

2.J Dinnes， P Sharma， et al。 Rapid， point-of-care antigen tests for diagnosis of SARS-CoV-2 infection。 Cochrane Database Syst Rev。 2022 Jul 22；7（7）：CD013705。 doi： 10.1002/14651858.CD013705.pub3。