衣原体单克隆抗体胶体金法测定沙眼衣原体

　　【摘要】 　　目的：介绍一种沙眼衣原体的快速检测方法。

　　方法：采用衣原体单克隆抗体胶体金法进行实验室诊断及鉴别诊断沙眼及其它结角膜病。

　　结果：阴性结果，仅检测板的质控区(C)有1条红线，检测区(T)无红线出现;阳性结果，除质控区(C)外，另有1条红线出现在检测区(T)。10例临床诊断沙眼的患者，其检测结果阳性率为100%。10例其他原因引起的慢性结膜炎患者，其中1例查到沙眼衣原体。10例慢性病毒性结膜炎患者中1例查到沙眼衣原体。

　　结论：该方法简便快速，仅0.5h可出结果，结果判断直观，不需要荧光显微镜、酶联检测仪等设备。具有广阔的推广应用前景。

　　关键词：沙眼;沙眼衣原体;衣原体单克隆抗体胶体金法;慢性结膜炎

　　【关键词】 沙眼 沙眼衣原体 衣原体单克隆抗体胶体金法 慢性结膜炎

　　0引言

　　沙眼是由沙眼衣原体引起的一种慢性传染性结膜角膜炎，可致盲。因其在睑结膜表面形成粗糙不平的外观，形似沙粒，故名。可发生于任何人群，主要见于卫生状况差的地区[1]。全世界约有3～6亿人口患沙眼。20世纪50年代以前，该病曾在我国广泛流行。70年代后，发病率大大降低。现在，重症沙眼已很少见，临床上常见的是一些处于一期或以前的不典型病例，单凭临床表现，只能初步诊断为疑似沙眼。另外有些结膜炎患者的症状和轻型沙眼的症状十分相像，如不及时确诊，势必延误治疗。既往实验室采用鸡胚细胞培养法分离衣原体，虽然特异性强，但成本昂贵，费时费力，且受多种因素影响，难以推广应用。70年代初建立的微量免疫荧光法，相对简便快速，但因应用多价抗体，不易标准化。衣原体单克隆抗体的问世，有效的克服了上述两种方法的缺点，采用荧光、酶、胶体金等标记衣原体单克隆抗体，用于实验诊断，具有快速、简便、特异性强、检出率高等优点。本文利用衣原体单克隆抗体胶体金法诊断和鉴别诊断30例眼病患者，现将结果报告如下。

　　1对象和方法

　　1.1对象 选取的30例患者均系西安市眼科医院门诊或住院病房。其中男16例，女14例，年龄 7～70岁。胶体金衣原体单克隆抗体诊断盒：购自上海凯创生物技术有限公司。

　　1.2方法 用5g/L地卡因麻醉，使用试剂盒提供的配套拭子于结膜上穹隆部反复擦拭以保证取到大量细胞。将样品处理管放在工作台上，加入6滴溶液A，将采样拭子放入含有溶液A的样品处理管中，室温放置，在处理过程中不断旋转并在管壁挤压拭子，使液体不断被挤出，重复多次，处理2min。然后加入6滴溶液B，旋转并挤压拭子，尽量使液体流出，处理2min。将样品处理管中已处理的样品滴加2～3滴至检测试剂盒的加样孔中，等待结果的出现，加样10min时可判读结果，为确保阴性结果，请勿在15min后判断结果。最后按感染物品的处理方法将拭子丢弃.处理后的样品如在60min内使用，并不影响试剂盒的检测结果。

　　阴性结果，仅质控区(C)有一条红线，检测区(T)无红线出现(图1)。阳性结果，除质控区(C)外，另有一条红线出现在检测区(T)(图1)。无效结果， 质控区(C)不出现红线,则结果无效。应更换新的检测试剂盒重复实验。可用剩余的已处理的样品或重新取样。

　　图1 沙眼衣原体(略)

　　A：阴性;B：阳性

　　2结果

　　临床明确诊断沙眼的患者10例，其检测结果阳性率为100%。10例其他原因引起的慢性结膜炎患者，其中1例查到沙眼衣原体。10例慢性病毒性结膜炎患者中1例查到沙眼衣原体。

　　3讨论

　　衣原体是介于立克次氏体和病毒之间的一种原核微生物，呈球形，直径约0.3～0.5μm，有细胞壁。能致沙眼的病原体就目前所知有多种血清型。我国目前沙眼发病率大为降低，但诊断却愈来愈困难，主要原因是轻型沙眼的症状和其他类型的结膜炎临床难以区分，如不及时诊治，将会出现倒睫、角膜血管翳、内翻倒睫等引起角膜损害，影响视力甚至可致盲。胶体金检测法简便快速，比直接免疫荧光法[2,3]更省时，仅0.5h就可出结果，结果判断直观，不需要荧光显微镜、酶联检测仪等设备。具有广阔的推广应用前景。试剂盒采用的是抗衣原体属特异性脂多糖LPS单克隆抗体，因此，不但可用于眼科，更重要的是可用于妇产科、泌尿科、性病科等沙眼衣原体感染性疾病的诊断。

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