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吴志全 主治医师
河北医科大学附属平安医院
二级甲等
儿科
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杯状病毒性胃肠炎:检查HuCV感染可通过直接检查病人粪便中的病毒颗粒和病毒核酸,或检测病人血液中的抗病毒抗体加以诊断。1.电镜法利用直接电镜(EM)或免疫电镜(1EM)负染技术检测病人粪便上清液中病毒颗粒。应注意在发病早期收集标本。IEM法对发病72h内的标本阳性检出率可达50%,随后降低到20%以下。由于粪便中病毒含量较低,EM法的灵敏度不高;EM法在检测诺如病毒时更为困难,因为该属病毒缺少典型的杯状病毒外观。2.放射免疫法(RIA)和酶联免疫法(E1A)可检删粪便标本中的病毒颗粒、可溶性抗原及血清抗体。RIA和EIA法在检测粪便标本抗原时,敏感度类似,均较IEM法敏感10一100倍,但在检测血清抗体时,EIA阻断法较RIA阻断法约灵敏2倍。EIA法因不使用同位素,试剂更稳定,封闭所需时间短,较RIA法更为实用。目前,应用杯状病毒重组诺沃克病毒衣壳蛋白抗原建立的EIA能有效检测抗体,已广泛用于检测病毒感染和流行病学调查。但RIA和EIA法特异性强,对非同一遗传组的病毒无法检出。3.核酸检测包括斑点杂交法和逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)。斑点杂交法用于检测粪便中的札幌病毒时,以RNA依赖的RNA聚合酶区序列为模板,制备cDNA探针,该法较EIA法灵敏,与RT-PCR法相比,其潜在优点是造价低和交叉污染的危险性小,但要注意非特异性杂交引起的假阳性和粪便标本颜色对读值的干扰等问题。RT-PCR法用于检测粪便、被污染的水和食物样品中的病毒核酸。引物序列多选自RNA依赖的RNA聚合酶区,不同遗传组的病毒株需用不同引物。本法灵敏度高于EIA法和斑点杂交法,是目前最常用的HuCVS检测方法。用于RT-PCR的粪便标本可在4℃保存几个月或在一70℃下存放10年以上。诊断及鉴别诊断:细茁、寄牛虫和病毒均可引起急性胃肠炎暴发.病毒诱因包括HuCVs、轮状病毒、星状病毒和腺病毒。在一次腹泻流行中符合以下标准者.可初步诊断为HuCVs感染:①在粪便标本中排除特异性病原菌和寄生虫感染;②平均潜伏期为24~48小时;③诺如病毒感染50%以上发生呕吐;④平均病程为12—60小时;⑤粪便、血常规检查无特殊发现。进一步确定病因需结合上述实验室检测方法。
2018-04-03 20:28
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